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一、環境與硬件準備
1. 環境控制
溫度：20–25℃，波動≤±1℃；濕度：40%–60%，避免結露。
遠離振動源（如離心機、風機）、強電磁場與直吹氣流，臺面穩固防滑，機械泵獨立放置，避免與儀器接觸傳振。
電源：配 UPS 防斷電；主斷路器置On，電子服務開關設Operating ModeThermo Fisher。
2. 氣體與真空
氮氣：純度≥99.999%，壓力 800±30 kPa（8±0.3 bar），每日檢漏，鋼瓶留余壓≥500 kPa。
真空啟動：開機抽真空≥2 小時，UHV 低于 10?? mbar；Bakeout（12 小時）后，FT 分析器穩定≥8 小時，真空達 10?1? mbar 級再測試。
頻繁開關機：短期（1–3 天）保持真空；長期（>1 周）關機需按規程放空，保護渦輪泵。
二、開機與校準（數據準確核心）
1. 開機流程
上電后啟動系統，機械泵→渦輪泵→真空建立；斷電恢復后若已放空，需重新 Bakeout。
進入On 模式至少 90 分鐘后再校準，避免直接從 Off 模式校準Thermo Fisher。
2. 校準要求
日常：每日做質量校準；受控環境可每周 1 次；確保 24 小時內質量偏差＜3 ppm（外標）、1 ppm（內標，鎖質量）Thermo Fisher Scientific。
月度：系統校準（含四極桿隔離質量與分辨率）Thermo Fisher Scientific。
調諧合格指標：
正離子：NL＞1.0e8、IT＜5 ms，特征峰（m/z 195、524、922–1822）清晰。
負離子：NL＞1.0e8、IT＜5 ms，特征峰（m/z 265、514、1280–1780）清晰Thermo Fisher。
TIC 波動＜10%（穩定噴霧關鍵）Thermo Fisher Scientific。
3. 校準操作
正 / 負離子模式分別用對應校準液（賽默飛貨號 88323/88324），以 5 μL/min 輸注，確認噴霧穩定再執行Thermo Fisher。
校準后用Evaluate 功能驗證，不合格需重復校準Thermo Fisher。
三、樣品與進樣規范
1. 樣品制備
濃度：單樣品≤10 μg/mL，過高易污染離子源。
溶劑：優選色譜級甲醇 / 水；難溶物先用二氯甲烷等溶解，再用甲醇 / 水稀釋；禁用強酸強堿、難揮發溶劑（如 DMSO、DMF、表面活性劑）。
過濾：配置后經 0.22 μm 濾膜過濾，去除不溶物。
體積：樣品瓶體積≥0.5 mL；低于 0.5 mL 需用內插管，避免空針。
2. 進樣操作
使用匹配規格樣品瓶、瓶蓋與預切割墊，避免損壞進樣針；瓶蓋適度擰緊，過緊易引發負壓空針。
進樣前檢查管路無氣泡、無漏液，流速與梯度符合方法要求。
四、方法與參數設置
1. 基礎參數
掃描模式：根據需求選 Full MS、SIM、AIF-MS/MS 等；分辨率設 35,000 及以上時，正負掃描循環約 1 秒Thermo Fisher Scientific。
AGC 目標：過高易導致空間電荷 / 聚束效應，過低則靈敏度下降；參考默認模板，按需微調Thermo Fisher Scientific。
注射時間（IT）：與 AGC 聯動，避免過長導致污染或信號飽和。
極性切換：支持，切換時間約 250 ms；正負同時掃描時，需匹配循環時間需求Thermo Fisher Scientific。
2. 離子源設置（H-ESI 為例）
鞘氣（Sheath Gas）：正離子 5–10，負離子 7–12；輔助氣（Aux Gas）正離子 2、負離子適量，以 TIC 穩定為準Thermo Fisher Scientific。
噴霧電壓：正離子約 4 kV，噴霧電流～0.9 μA；毛細管溫度 320℃，S-lens RF 水平 50（參考值，按需優化）Thermo Fisher。
離子傳輸管（ITT）：根據污染頻率更換，信號下降 / 背景升高 / 源壓異常時及時清潔或更換Thermo Fisher Scientific。
五、日常維護與污染控制
1. 日常清潔
每日：清潔離子源腔體、噴霧針、樣品盤；檢查毛細管入口無堵塞。
每周：清潔樣品瓶架、進樣針；檢查氣路密封。
離子源清潔：取下腔體、加熱模塊、毛細管，用 50% 甲醇水超聲 15 分鐘，晾干后安裝。
2. 定期維護
| 周期 | 維護內容 |
|---|---|
| 6–12 個月 | 更換機械泵油（用原裝油，油位在刻度線間；不同品牌油需新油沖洗），清潔泵濾網，檢查 密封 |
| 每 2000–300 樣品 / 年度 | 深度清潔離子光學部件（透鏡、多極桿），檢查電子倍增器（增益下降明顯時更換） |
| 年度 | 2 次專業保養（離子源 / 透鏡 / 傳輸桿清洗、真空系統檢查、液相校準、電氣檢測） |
六、關機與數據管理
1. 關機規范
分析結束：推薦留Standby 模式，不直接關機，保障下次質譜精度Thermo Fisher。
長期關機：按規程放空真空，關閉氮氣與電源，做好儀器防塵保護。
2. 數據安全
數據存至課題組專屬文件夾，避免覆蓋；U 盤拷貝前先格式化，防止病毒或格式沖突。
原始文件保留，定期備份，命名規范（含日期、樣品、批次）。
七、安全與應急
高壓風險：操作時禁止觸碰離子源、高壓接口；維護前斷電并釋放靜電。
真空泄漏：若 Tune 顯示壓力異常，立即停機檢漏，嚴禁帶壓操作。
污染應急：信號驟降 / 背景升高時，優先清潔離子源與 ITT；必要時聯系賽默飛工程師。
